材料与方法

1.1 主要试剂

  ✦ 酸吉灵（酸化剂，主要成分为苯甲酸）取自吉隆达生物科技集团有限公司；

  ✦ 指示菌：金黄色葡萄球菌（CICC10001）、大肠埃希氏菌（CICC10003）购自中国工业微生物菌种保藏管理中心；

  ✦ 营养琼脂、琼脂。

1.2 主要仪器

  牛津杯（7.78 mm）、霉菌培养箱、高压灭菌锅、水浴恒温振荡器、紫外分光光度计、游标卡尺

试验方法

2.1 指示菌的活化

  指示菌经37℃、180r/min摇床培养活化后，使用紫外可见光分光光度计测量OD值，当OD值在0.50左右时停止培养。

2.2 试验设计

  如表1所示，将酸吉灵用去甲醇溶解，配成浓度分别为2.00%、1.00%、0.50%、0.25%的4种的溶液备用。按照2.2所述的试验方法进行抑菌试验。每个处理浓度设3平行。

表1 试验设计

2.3 牛津杯双层板法测抑菌直径

  在已灭菌的培养皿上倒一层薄琼脂液，待琼脂凝固后，每个平板中放置3个牛津杯，倒入15 ml含菌营养琼脂。待培养基凝固之后用镊子取出牛津杯，并做好标记，在小孔中分别加入100 μl样液（对照组选用无菌水）。加样完成后，静置1 h后放37℃培养箱培养。待抑菌圈形成后，用游标卡尺测量抑菌圈直径并记录数据，读数精确至0.001 mm。

结果与分析

  不同浓度酸吉灵对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌圈大小如表2所示。酸吉灵的体外抑菌圈直径随浓度的降低变小，抑菌能力也随之减弱。由图1可知，酸吉灵对大肠杆菌的体外抑菌能力略优于对金黄色葡萄球菌的体外抑菌能力。

表2 酸吉灵体外抑菌直径均值/mm

图1 酸吉灵体外抑菌直径/mm

讨论

  金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌是比较常见的致病菌，能够引起畜禽多种肠道问题和疾病。

  本试验中，牛津杯周围出现明显的抑菌圈，表明酸吉灵对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌有明显抑制作用，抑菌圈直径越大，表明抑菌能力越强。

  酸吉灵是一种固体有机酸化剂，其主要成分为苯甲酸。苯甲酸分子可改变细菌细胞膜通透性，进入细胞中，改变胞内pH，抑制细胞基础代谢反应，破坏胞内蛋白质，抑制细胞内呼吸酶系统和电子传递酶系统的活性，从而达到达到抑菌和杀菌作用。

  许多研究表明，苯甲酸有良好的的抑菌效果，并且对大多数微生物均有抑制作用，与本试验结果相符合。

结论

  本试验结果表明，酸吉灵是一种抑菌效果优良的有机酸化剂。

展望

  苯甲酸在体外可以马尿酸的形式随尿液排出体外，不在体内蓄积，并且有文献表明，苯甲酸在动物日粮中添加，可调节肠道菌群结构、降低腹泻率、改善饲料的转化率，提高生长性能。因此酸吉灵是一种安全绿色的功能型酸化剂，抑菌效果优良，可展开动物实验加以验证，并进行推广使用。

图2牛津杯

图3 抑菌圈图（试验现场部分图）

  四川吉隆达生物科技集团有限公司，在全球拥有近2000家客户，产品覆盖30多个国家和地区。涉及添加剂饲料，生物饲料添加剂，蛋鸡饲料添加剂，市场占有率达20%。